脈絡(luò)膜新生血管促進(jìn)因子的研究進(jìn)展

【摘要】  脈絡(luò)膜新生血管(choroidal neovascularization，CNV)是危害視力的主要病變之一，為多種眼底疾病的最終結(jié)局，最終導(dǎo)致嚴(yán)重的視力喪失。脈絡(luò)膜新生血管的產(chǎn)生與促進(jìn)與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子與促血管生成素有著密切的關(guān)系，我們就這兩種細(xì)胞因子的來(lái)源與作用的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

【關(guān)鍵詞】  脈絡(luò)膜新生血管;血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子;促血管生成素

　　AbstractChoroidal neovascularization(CNV) is the important reason for a series of fundus oculi diseases which usually lead to vision loss. The forthing and developing of the CNV are regulated and controlled mainly by vascular endothelial growth factor(VEGF) and angiopoietin��1/2. So we summarize the advance of research on the causation and the effect of the two factors.

　　�rKEYWORDS： choroidal neovascluarization;vascular endothelial growth factor;angiopoietin��1/2

    　0引言

　　脈絡(luò)膜新生血管(choroidal neovascluarization, CNV)與許多眼底病有關(guān)，常最終致視力的喪失。CNV形成的具體機(jī)制目前尚未完全明了，現(xiàn)就其產(chǎn)生與促進(jìn)生成的主要細(xì)胞因子VEGF與Ang的研究進(jìn)展情況做一綜述。

　　1血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子教師職稱論文發(fā)表

　　1.1血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子來(lái)源及其家族 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)是一種自分泌型堿性蛋白，CNV模型研究發(fā)現(xiàn)VEGF起源于巨噬細(xì)胞、RPE細(xì)胞、微血管內(nèi)皮細(xì)胞、周細(xì)胞等，其中巨噬細(xì)胞是最主要來(lái)源[1]。不同形式的基因連接形成4種主要的同源多肽，分別由121，165，189，206個(gè)氨基酸組成，含有共有序列，不同形式的多肽連接方式?jīng)Q定它們與受體相關(guān)結(jié)構(gòu)的相互作用能力[2]。后又發(fā)現(xiàn)一個(gè)新的變異連接家族，命名為VEGF×××b[3]，具有末端外顯子8點(diǎn)，使得表達(dá)出的蛋白具有相同的長(zhǎng)度，但是有不同C�材┒税被�酸序列。受體連接段與二聚體段是完整的，但是對(duì)于VEGF165b，它不但并不具有刺激血管生成的作用，相反具有抑制VEGF165的促血管擴(kuò)張、增殖與移行的作用，這組VEGF分子的重要性尚有待研究[4]。VEGF的受體主要包括VEGFR��1，��2和��3，VEGFR��1的生物學(xué)效應(yīng)表現(xiàn)為誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞的遷移。VEGFR��2主要影響并介導(dǎo)VEGF�睞促有絲分裂。VEGFR��3與其特異的配體VEGF�睠，�睤結(jié)合引起內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移，對(duì)胚胎發(fā)育及腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移起重要調(diào)控作用[5]。VEGF還可與受體 NRP��1/2結(jié)合，而后者與硫酸肝素蛋白多糖能夠影響VEGFRs的活性[6]。研究表明在VEGFR��2與NRP��1共表達(dá)的細(xì)胞上，NRP��1可以增強(qiáng)VEGFR��2介導(dǎo)的信號(hào)通路的有效性，所以能結(jié)合NRP��1的VEGF�睞165比不能結(jié)合的VEGF�睞121促有絲分裂活性高，但目前還未找到結(jié)合VEGF�睞165后NRP��1/ NRP��2介導(dǎo)的信號(hào)通路[7]。正常視網(wǎng)膜同時(shí)表達(dá)VEGF的mRNA與蛋白[8]。已證實(shí)VEGF是由RPE細(xì)胞旁分泌產(chǎn)生的，RPE細(xì)胞向基底膜也就是脈絡(luò)膜毛細(xì)血管側(cè)分泌的VEGF是向視網(wǎng)膜神經(jīng)層的2～7倍，在缺氧的情況下的差異會(huì)更大[9]。根據(jù)對(duì)RPE細(xì)胞中VEGF受體的研究發(fā)現(xiàn)，VEGF發(fā)揮作用的機(jī)制除旁分泌后，還包括自分泌方式[10]，證實(shí)RPE與脈絡(luò)膜毛細(xì)血管之間的關(guān)系是前者促進(jìn)后者生成，后者缺乏前者則萎縮，這可能是脈絡(luò)膜萎縮的一個(gè)重要原因。

　　1.2 VEGF促血管生成作用及其機(jī)制的研究進(jìn)展 VEGF的促血管生成作用表現(xiàn)在可使EC中血管通透性增高，造成血漿蛋白滲漏，具有營(yíng)養(yǎng)EC的作用，為其生長(zhǎng)提供條件[11]。在缺氧或炎癥等失衡狀況時(shí)作用則相反：缺氧可上調(diào)其mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)[12]，它成為眼內(nèi)新生血管的刺激因子。它誘導(dǎo)尿激酶型和組織型纖維蛋白溶解酶激活物的表達(dá)，同時(shí)也誘導(dǎo)MMPs和膠原酶的表達(dá)，促進(jìn)ECM降解，利于EC移行。在VEGF轉(zhuǎn)基因鼠中VEGF mRNA和蛋白分子高水平表達(dá)，能引起CNV生成和牽拉性視網(wǎng)膜脫離。Leske等[13]在大鼠ROP模型中通過(guò)qRT�睵CR 可以檢測(cè)到在新生血管化過(guò)程中VEGF mRNA的表達(dá)，抗VEGF療法可明顯抑制眼內(nèi)CNV產(chǎn)生。VEGF啟動(dòng)視網(wǎng)膜新生血管形成的作用是血管擴(kuò)張及通透性增加，然后經(jīng)過(guò)血管壁基底膜酶的降解、內(nèi)皮細(xì)胞的趨化與遷移有絲分裂和周細(xì)胞的相互作用，促進(jìn)血管腔形成[14]。 VEGF與VEGFR結(jié)合后，VEGFR首先自磷酸化，繼而激活磷脂酰膽堿特異性磷脂酶C(PLCr)，水解磷脂酰肌醇二磷酸(PIP2)，產(chǎn)生二脂酰甘油(DAG)和肌醇三磷酸(IP3)，其中DAG可激活胞質(zhì)中蛋白激酶C(PKC)，并固定于膜上，然后誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)，增加血管滲透性。有研究認(rèn)為缺氧在新生血管形成初始可能起雙重作用。一方面是分子水平。視網(wǎng)膜內(nèi)層缺氧引起VEGF的高表達(dá)，視網(wǎng)膜生成的VEGF不斷上調(diào)引起其在視網(wǎng)膜和玻璃體液中積聚，為新生血管形成做準(zhǔn)備。另一方面是細(xì)胞水平，星狀細(xì)胞缺氧發(fā)生變性，其使視網(wǎng)膜血管附著于視網(wǎng)膜并保持完整的作用被破壞，視網(wǎng)膜血管增生或長(zhǎng)入玻璃體，同時(shí)血管壁內(nèi)皮細(xì)胞接觸玻璃體中的VEGF，則向玻璃體內(nèi)生長(zhǎng)形成微動(dòng)脈瘤和視網(wǎng)膜前新生血管[15]。

　　2促血管生成素教師職稱論文發(fā)表

　　促血管生成素(angiopoietin，Ang)分子家族是一類由血管內(nèi)皮周圍細(xì)胞分泌的糖蛋白，調(diào)控VEGF誘導(dǎo)的新生血管生成，其中最重要的是Ang��1與Ang��2。

　　2.1 Ang��1的促血管生成作用 人類Ang��1主要由血管旁細(xì)胞包括周細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞分泌表達(dá)[16]。Ang��1與Tie��2結(jié)合后，在VEGF等生長(zhǎng)因子的存在下，能夠抑制內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，提高細(xì)胞存活力。Ang�瞝吸引血管周細(xì)胞和內(nèi)皮平滑肌細(xì)胞聚集并相互作用，從而增強(qiáng)血管內(nèi)皮細(xì)胞間連接從而有利于維持血管壁完整，促進(jìn)血管重塑、成熟并在血管生成過(guò)程中促進(jìn)出芽及分支的作用[17]。缺乏Ang��1基因表達(dá)的小鼠其胚胎血管發(fā)育異常[18]，血管網(wǎng)生成簡(jiǎn)單血管重塑缺陷，管徑無(wú)明顯區(qū)別，且周細(xì)胞缺如，膠原纖維樣細(xì)胞分散，纖維絲短縮，而這些是維持血管穩(wěn)定的關(guān)鍵因素。9d就出現(xiàn)心臟發(fā)育缺陷，心室內(nèi)僅有內(nèi)皮細(xì)胞襯而缺少心肌小粱，12d出現(xiàn)胚胎死亡。過(guò)度表達(dá)Ang��1的轉(zhuǎn)基因小鼠，血管管腔增大，血管基底膜連接更為完整，這提示Ang��1可能增加血管管徑而不增加萌出分支，Ang��1與VEGF協(xié)調(diào)互補(bǔ)，VEGF誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖形成管腔，Ang��1則增強(qiáng)細(xì)胞間的連接、穩(wěn)定血管壁的完整。Ang��1還可以通過(guò)細(xì)胞整合素發(fā)揮作用引起細(xì)胞遷移。Kim等[19]證實(shí)Ang��1可以誘