青蒿琥酯對H22小鼠肝癌的體內抑瘤作用

【摘要】  目的：探討青蒿琥酯對H22小鼠肝癌的體內抑瘤作用。方法：取雌性KM小鼠40只，將H22小鼠肝癌細胞接種于小鼠右前肢腋皮下，隨機分為模型對照組(Control)、環磷酰胺組(CTX)及青蒿琥酯(ASUN)30、90、150mg/kg低、中、高三個劑量組，共5組，每組8只。連續腹腔注射給藥8天后，剝取瘤塊和脾臟，稱重，計算抑瘤率。結果：青蒿琥酯30、90、150mg/kg劑量組的抑瘤率分別為38.9%、31.1%和21.5%，抑瘤率隨劑量增大而降低，其中青蒿琥酯30mg/kg劑量組與模型對照組比較，差異有統計學意義(P<0.05);荷瘤小鼠脾質量隨青蒿琥酯劑量增加而增大。結論：青蒿琥酯對H22小鼠肝癌具有體內抑瘤作用。

【關鍵詞】  H22小鼠肝癌青蒿琥酯抑瘤作用

　AbstractObjective:To analyzed the inhibitory effect of Artesunate (ASUN) on hepatocarcinoma in H22 mice.　　Methods:Hepatocarcinoma model was established in 40 female KM mice by implanting H22 cell line.These mice were randomized into control group,cyclophosphamide(CTX) group and ASUN group.The ASUN groups were divided into 3 subgroups based on different doses of 30,90 and 150 mg/kg.Eight mice were in each group.Intervention methods were given for 8 days and inhibitory rate was calculated after treatment.Results:The inhibitory rates were 38.9%,31.1%,and 21.5% in 30,90,and 150 mg/kg ASUN groups.The inhibitory rate in the ASUN group of 30 mg/kg was significantly different to the control group (P<0.05).Spleen weight bearing carcinoma increased as the dose of ASUN increased.Conclusion:ASUN can inhibit the growth of hepatocarcinoma cell in H22 mice.

　　Key wordsH22 micehepatocarcinomaartesunateinhibitory effect

　　青蒿琥酯(Artesunate，ASUN)是通過化學方法對倍半萜內酯類青蒿素(Artemisinin)進行結構改造獲得的水溶性衍生物，具有低毒、高效、速效的作用特點。臨床上用于搶救和治療腦型瘧和惡性瘧等療效顯著。多篇文獻報道，青蒿琥酯具有體內、外抗腫瘤作用[1-3]。但腹腔注射青蒿琥酯給藥對H22小鼠肝癌體內抗腫瘤試驗報道尚少。為此，我們進行該方面的實驗研究，現報道如下。

　　1實驗材料藥學論文發表

　　1.1藥物注射用青蒿琥酯(ASUN)(60mg/支，批號011201，中國廣西桂林第二制藥廠);注射用環磷酰胺(CTX)(批號09010321，江蘇恒瑞醫藥股份有限公司)。

　　1.2瘤株H22小鼠肝癌細胞株，購自中山大學實驗動物中心細胞庫。

　　1.3動物KM小鼠，SPF級，40只，雌性，18～22g，廣東省醫學實驗動物中心，動物質量合格證：SCXK(粵)2008-0002。

　　2實驗方法

　　2.1藥物配制注射用青蒿琥酯(ASUN)，用5%NaHCO3溶解，再用生理鹽水配制成1.5、4.5、7.5mg/ml低、中、高三個濃度，按0.2ml/10g給藥，給藥劑量分別為30、90、150mg/kg;取注射用環磷酰胺(CTX)，用生理鹽水配制成2mg/ml，按0.1ml/10g給藥，給藥劑量為20mg/kg。所配溶液均于冰箱保存備用。

　　2.2取瘤種無菌操作，將H22小鼠肝癌細胞株腹腔接種小鼠，于第10天選擇腹水飽滿小鼠，用碘酒、75%乙醇局部消毒，無菌條件下抽取出腹水，用生理鹽水按體積比1∶3稀釋成瘤細胞懸液。

　　2.3接種瘤液給每只小鼠右前肢腋皮下準確接種瘤液0.2ml(細胞數約2×107)。

　　2.4分組給藥接種24小時后，將小鼠隨機分為青蒿琥酯低、中、高劑量組，CTX組和模型對照組，每組8只。青蒿琥酯按0.2ml/10g體重腹腔注射給藥，CTX按0.1ml/10g體重腹腔注射給藥，模型對照組腹腔注射生理鹽水，1天1次。各組均連續注射8天。至實驗結束，各組無小鼠死亡。

　　2.5稱瘤重末次給藥后24小時，頸椎脫臼處死小鼠，稱體重，剝取瘤塊和脾臟，稱重，計算抑瘤率(%)。抑瘤率(%)=(模型對照組平均瘤重-給藥組平均瘤重)/模型對照組平均瘤重×100%。

　　2.6統計學方法實驗數據均以(±s)表示，應用SPSS 11.0統計軟件，用t檢驗進行統計學處理。
3實驗結果

　　CTX組的抑瘤率為58.9%，對H22小鼠肝癌具有非常明顯的體內抑制作用(P<0.01)。青蒿琥酯30、90、150mg/kg劑量組的抑瘤率分別為38.9%、31.1%和21.5%，抑瘤率隨劑量增大而降低。其中青蒿琥酯低劑量組與模型對照組比較，差異有統計學意義(P<0.05)。荷瘤小鼠脾質量隨青蒿琥酯劑量增加而增加，見表1。表1青蒿琥酯對H22荷瘤小鼠體質量、脾臟及瘤體量的影響

　　4討論

　　青蒿琥酯是我國首創的抗瘧有效藥物，臨床上主要用于治療瘧疾，而用于治療癌癥報道較少。本文以荷瘤小鼠實體瘤重、抑瘤率為指標評價青蒿琥酯對H22小鼠肝癌的抑瘤作用。結果表明，青蒿琥酯低劑量(30mg/kg)具有明顯的抑瘤作用，但隨劑量增加而作用效果減弱，給藥劑量與抑瘤率沒有正相關關系。據有關文獻報道，青蒿琥酯對H22小鼠肝癌的體內抑瘤劑量不穩定[3-5]，但最佳抑瘤劑量有待進一步的研究。實驗發現，青蒿琥酯能使荷瘤小鼠的脾質量增加，且隨劑量增加而增加，但是否反映機體免疫水平的提高[6]，有待進一步的研究。

【參考文獻】教師論文發表網 
  　\[1\]Efferth T,Dunstan H,Sauerbrey A,et al.The anti-malarial artesunate is also active against cancer\[J\].Int J Oncol,2001,18(4)：767-773.

　　\[2\]王勤,吳理茂,李愛媛,等.青蒿琥酯抗肝癌作用的實驗研究\[J\].中國中藥雜志,2001,26(10)：707-708.

　　\[3\]盛慶壽,張華,農慧,等.青蒿琥酯對H22小鼠腫瘤VEGF表達的影響\[J\].中藥藥理與臨床,2008,24(2)：8-10.

　　\[4\]肖柳英,林培英,張丹,等.青蒿琥酯對小鼠肝癌及S180實體瘤的抑制作用\[J\].實用癌癥雜志,2001,16(3)：245-246.

　　\[5\]武曉,張玉萌.青蒿琥酯抗腫瘤作用的實驗