p57kip2和p21cip1在人腦膠質瘤中的表達和臨床意義

【摘要】  　　目的 探討p57kip2蛋白、p21cip1蛋白在人腦膠質瘤中的表達情況及其臨床意義。方法 采用免疫組織化學SP法檢測p57kip2、p21cip1在55例人腦膠質瘤和10例正常腦組織中的表達。結果 在55例膠質瘤中，p57kip2蛋白陽性率為38.2%(21/55)，顯著低于正常腦組織的80%(8/10)(P= 0.036)。p57kip2蛋白表達在低度惡性(Ⅰ-Ⅱ級)組顯著高于高度惡性(Ⅲ-Ⅳ級)組(P=0.029)，生存時間≥2年組顯著高于<2年組(P=0.032)。腦膠質瘤中p21cip1蛋白陽性率為60.0%(33/55)，與正常腦組織的90.0%(9/10)相比，差異無統計學意義(P=0.143)。p21cip1蛋白表達在高度惡性(Ⅲ-Ⅳ級)組顯著低于低度惡性(Ⅰ-Ⅱ級)組(P=0.047)，生存時間<2年組顯著低于≥2年組(P=0.002)。p57kip2蛋白的表達與p21cip1蛋白的表達存在正相關(rs=0.354，P=0.008)。結論 p57kip2蛋白和p21cip1蛋白在腦膠質瘤中存在異常表達，p57kip2蛋白和p21cip1蛋白的表達程度與腦膠質瘤的分化程度、預后相關。

【關鍵詞】  p57kip2蛋白 p21cip1蛋白 膠質瘤 免疫組織化學

　　ABSTRACT: Objective  To explore the expressions of p57kip2 and p21cip1 in human gliomas and their clinical significance. Methods  P57kip2 and p21cip1 were detected by SP immunohistochemical technique in 55 human glioma and 10 normal brain tissues. Results  Expression rate of p57kip2 protein in human glioma was 38.2%(21/55), which was significantly lower than that in normal brain tissues 80%(8/10) (P=0.036). P57kip2 expression in low malignance group (Ⅰ-Ⅱ grade) was significantly higher than that in high malignance group (Ⅲ-Ⅳ grade) (P=0.029) and in survival time ≥2 years group was significantly higher than that in <2 years group (P=0.032). Expression rate of p21cip1 protein in human glioma was 60.0 % (33/55), not significantly lower than that in normal brain tissues 90.0% (9/10) (P=0.143). P21cip1 expression in high malignance group (Ⅲ-Ⅳ grade) was significantly lower than that in low malignance group (Ⅰ-Ⅱ grade) (P=0.047) and in survival time<2 years group was significantly lower than that in ≥2 years group (P=0.002). There was a positive correlation between the expression of p57kip2 and p21cip1 (rs=0.354, P=0.008). Conclusion  The expression of p57kip2 protein and p21cip1 protein is deregulated in glioma, and its degree is correlated with the glioma differentiation and prognosis. The combined analysis of p57kip2 and p21cip1 expression is considered to be more reliable.

　　KEY WORDS: p57kip2 protein; p21cip1 protein; glioma; immunohistochemistry

　　近來研究表明，細胞周期調控異常與細胞癌變密切相關，二者的關系是腫瘤學研究的熱點問題之一［1］。細胞周期調控系統由細胞周期蛋白(cyclin)、細胞周期蛋白依賴性激酶(cyclin-dependent kinase, CDK)和CDK抑制因子(cdk inhibitor, CKI)組成。Cyclin與CDK以Cyclin-CDK復合物的形式發揮作用，CKI能競爭性地與CDK結合，抑制其活性，從而調整細胞周期。新近發現的p57kip2為細胞周期調控因子CKIs家族的新成員，是細胞周期G1/S期的重要調控因子，與多種腫瘤的發生、發展有關［2-4］。但p57kip2蛋白的表達與腦膠質瘤的關系以及p57kip2蛋白與p21cip1蛋白在腦膠質瘤發生發展中的關系目前尚不清楚。本文應用免疫組織化學技術，探討p57kip2、p21cip1在腦膠質瘤組織和正常腦組織中以及不同生存期的腦膠質瘤組織中的表達和意義。

　　1  材料與方法

　　1.1  材料 高級職稱論文發表

　　55例腦膠質瘤標本為西安交通大學醫學院第二附屬醫院2002-2004年手術存檔石蠟標本，術后均經病理診斷證實為腦膠質瘤，其中星形細胞瘤42例，多形性膠質母細胞瘤6例，少突膠質細胞瘤5例，室管膜瘤2例。病例中男28例，女27例，年齡4-71歲，平均40.1歲。生存時間≥2年24例，<2年31例。根據2000年修改的WHO神經系統腫瘤分類標準，對所有腫瘤進行組織學分類和分級。其中，Ⅰ級12例，Ⅱ級17例，Ⅲ級18例，Ⅳ級8例。另10例正常對照腦組織取自我院因顱腦損傷行內減壓術的患者，男女各5例，年齡10-65歲，平均36.5歲。所有患者均未經過放療或化療。鼠抗人p57kip2單克隆抗體(NeoMarkers公司，1∶400)、鼠抗人p21cip1單克隆抗體(NeoMarkers公司，1∶100)、廣譜SP試劑盒購自深圳晶美生物技術有限公司。

　　1.2  免疫組化染色

　　采用鏈霉素抗生物素-過氧化物酶法(SP法)檢測蛋白表達。每次實驗均以PBS代替一抗作為空白對照，陽性對照片由試劑公司提供。實驗操作按試劑盒說明書進行。

　　1.3  觀察測定方法
 
　　p57kip2蛋白和p21cip1蛋白均以胞核染色為棕褐色顆粒者為陽性細胞。400倍顯微鏡下每張載玻片計數500個細胞，依據染色陽性細胞數，計算陽性細胞所占百分比：<10%為陰性(-)；10%-25%為弱陽性(+)；26%-50%為陽性(��)；>50%為強陽性(��)。

　　1.4  統計學處理

　　應用SPSS 11.5統計軟件進行分析。用卡方檢驗、校正卡方檢驗及Spearman等級相關分析，P<0.05為差異有統計學意義。