促紅細胞生成素對缺氧缺血性腦病新生兒血清SOD,NO水平的影響

【關鍵詞】  促紅細胞生成素； 缺氧缺血性腦病； 超氧化物歧化酶； 氧化亞氮

缺氧缺血性腦病（hypoxic�瞚schemic encephalopathy，HIE）是導致新生兒死亡和致殘的重要原因。由于HIE的發病機理是多因素的、復雜的，其治療迄今尚無滿意的措施，因此，積極探索一套完整、合理、有效的治療方案是當前研究的熱點。近年來，促紅細胞生成素(erythropoietin，EPO)的非造血作用逐漸被認識［1］，有關EPO在神經系統中的作用已受到重視。國內外在腦損傷動物模型及治療腦損傷的初步研究中均顯示EPO有神經保護作用［1-3］，氧化亞氮（NO）是一種活性很強的自由基, 與O2構成氧化還原對，形成活性更強的氧化劑, 具有更大的潛在毒性［4］。SOD 為氧自由基的清除劑，對于保護機體免受自由基損傷起重要作用。因此測定SOD和NO含量對HIE療效觀察具有重要意義。本文通過觀察EPO治療HIE前后SOD,NO水平的變化,探討EPO在HIE患兒機體中的抗氧化作用, 為HIE的治療提供新的依據。

    1  對象與方法

    1.1  對  象

    選擇2006年3月～2008年2月入住我院的HIE患兒，診斷及分度參照HIE診斷標準和臨床分度標準［5］。納入本研究病例符合下列條件：①入院日齡≤24小時，出生體質量≥2 500 g的足月新生兒。②無嚴重先天畸形，如膈疝、腦發育不全。③無大量顱內出血、無嚴重呼吸道阻塞性疾病、無貧血。將符合入選條件的62例HIE患兒隨機分為兩組。治療組32例，胎齡（39.52±1.12）周，出生體質量（3 240±361）g。其中，男性17例，女性15例，輕度HIE 18例，中度HIE 8例，重度6例。觀察組30例，胎齡（39.97±1.27）周，出生體質量（3215±324）g，男性16例，女性14例。其中，輕度15例，中度9例，重度6例。兩組間一般情況差異無統計學意義（P＞0.05），同時選取同一時期本院正常陰道分娩的健康足月兒40例作為正常對照，其胎齡、出生體質量、性別與HIE組間差異也無統計學意義（P＞0.05）。

    1.2  治療方法

    兩組HIE患兒常規治療均根據新生兒HIE治療方案進行對癥和支持治療。治療組于出生后第2天，給予EPO（南京華欣制藥公司生產，批號20021024），按每日200 U/kg，靜脈滴注，連續用藥７天。

    1.3  檢  測

    1.3.1  標本采集  兩組HIE患兒均于出生后第1天及第8天（即EPO治療前后），分別采取股靜脈血3 ml，同時采取正常對照新生兒股靜脈血3 ml，3 000 r/min離心5 min后，取上清液分裝并冷凍于-20 ℃冰箱保存待測。

    1.3.2  檢驗方法及內容  ①SOD測定采用黃嘌呤氧化酶法，NO測定采用硝酸還原酶比色法。SOD,NO試劑盒均由南京建成生物工程研究所提供。②兩組HIE患兒治療后檢查血紅蛋白（Hb）、網織紅細胞計數（Ret）、血小板計數（PLT）、血電解質、血糖及肝腎功能。

    1.4  統計學方法

    所得數據以均數±標準差（±s）表示，用SPSS13.0軟件進行統計學分析，組間比較采用t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

    2  結  果

    急性期HIE患兒血清中SOD,NO水平與正常對照組比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

    中、重度HIE患兒急性期血清中的SOD,NO水平與輕度HIE患兒比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。  輕度HIE患兒應用EPO治療后血清中SOD,NO水平與治療前比較，差異無統計學意義（P＞0.05），中、重度HIE患兒應用EPO治療后血清中SOD,NO水平與治療前比較，差異有統計學意義（P＜0.05），而觀察組患兒在常規治療后血清中SOD,NO水平與治療前比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。見表2。表1  HIE組和對照組新生兒血清SOD,NO水平比較 表2  EPO治療前后血清SOD,NO水平比較教學論文發表

    EPO對其他系統的影響，結果見表3。治療組和觀察組HIE患兒治療后Hb,Ret,PLT比較，差異均無統計學意義（P＞0.05），也無明顯肝腎功能損害及電解質紊亂。 表3  兩組HIE患兒治療后Hb,Ret,PLT比較

    3  討  論

    促紅細胞生成素是主要由腎臟合成和分泌的受氧調節的一種糖蛋白激素，還廣泛分布于腦、肺、脾等部位。其分泌不依賴于其在血液中濃度的變化，而是在基因水平受到缺氧調控，當組織環境低氧時，EPO基因轉錄和表達增強［5］。近年來，大量實驗研究顯示，EPO有直接的神經營養和保護作用；另一方面能促進血管內皮細胞的成熟和存活，使血管再生更多的紅細胞轉移到缺氧缺血組織，減輕局部缺氧造成的損害以及通過促進神經膠質細胞的成熟與分化，減少神經膠質細胞的凋亡，起到間接的神經保護作用［6］。其作用機制可能是:①減輕興奮性氨基酸的細胞毒性；②抑制NO過度合成；③抑制脂質過氧化物的產生，從而減輕炎癥反應；④直接抗氧化作用。

 SOD是體內重要的自由基清除劑，其活性高低反映了機體對氧自由基的清除能力。HIE患兒腦缺氧缺血再灌注過程中，氧自由基大量產生，SOD則被大量消耗，活性明顯下降。NO是一種氧自由基性質的活性分子，是中樞神經系統的生理信使，缺氧缺血時過量的NO與超氧陰離子反應形成毒性更大的過氧化陰離子，對中樞神經系統產生很強的毒性作用，從而加重腦缺血-再灌注損傷導致神經元壞死［7］。有資料表明，新生鼠缺氧缺血后24小時NO大量釋放［8］，因此測定SOD,NO含量可作為早期診斷HIE較靈敏指標之一，同時對HIE的治療、病情程度及預后的判斷有重要意義［9］。

    本研究顯示，HIE患兒急性期血清中SOD濃度較正常對照組明顯下降，而NO水平則明顯升高（P＜0.05，表1）。其原因可能是缺氧缺血導致腦組織損傷，產生大量超氧陰離子，使SOD消耗較大，從而加劇了腦組織損傷。同時我們的觀察還發現，中、重度HIE與輕度HIE患兒血清中SOD,NO濃度差異有統計學意義（表2），說明患兒血清中SOD,NO水平高低可反映HIE的病情程度。另外從表3也可以看出，輕度HIE患兒在應用EPO治療前后血清中SOD,NO水平變化無明顯差異（P＞0.05），而中、重度HIE 患兒應用EPO治療后，血清中SOD濃度有明顯升高，NO濃度明顯下降（P＜0.05），說明應用EPO治療中、重度HIE患兒，能產生直接的抗氧化作用，同時能抑制NO引起的過度炎癥反應。

    有研究報道［6］，EPO治療新生兒HIE會引起Hb,Ret,PLT顯著升高。本研究未發現治療組應用EPO后Hb,Ret,PLT明顯升高（P＞0.05，表3），可能與（1）入選病例均為足月兒，（2）EPO的治療劑量和時間長短等因素有關，本組患兒也無肝腎功能損害和電解質紊亂。因此，EPO對新生兒HIE具有神經營養和神經保護作用，有助于早期神經功能的恢復，且無明顯不良反應，但其遠期效果如何，有待進一步隨訪觀察。

【參考文獻】
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