參附注射液對大鼠心肌損傷的保護作用

【摘要】  　　目的 觀察參附注射液對異丙腎上腺素致大鼠急性心肌缺血損傷的保護作用。方法 采用異丙腎上腺素制作大鼠心肌缺血損傷模型，BL-420記錄儀記錄大鼠肢體導聯心電圖，并檢測參附注射液對缺血損傷后大鼠血清磷酸肌酸激酶(CPK)乳酸脫氫酶(LDH)活性、心肌組織超氧化物歧化酶(SOD)及脂質過氧化物丙二醛(MDA)含量。結果 參附注射液能減輕異丙腎上腺素所致的大鼠心電圖ST段異常抬高；使心肌組織MDA的生成減少，SOD的活性增強；抑制CPK和LDH的釋放。結論 參附注射液對異丙腎上腺素所致大鼠心肌缺血損傷有一定的保護作用，其機制可能與抗脂質過氧化、提高SOD活力、降低心肌酶有關。

【關鍵詞】  參附注射液；心肌缺血損傷；大鼠

　　Abstract：Objective   To observe the protective effects of Shenfu injection on Isoprenaline caused by myocardal  ischemia injury in rats. Methods   The myocardial ischemia injury model was established by 20mg/kg of isoproterenol  in rats.ECG was recorded by BL��420.The activities of serum lactate dehdrogenase and creatine phosphor kinase,the enzyme activities of superoxide dismutase,and levels of malondialdehyde content of myocardium were all measured. Results   Shenfu injection  significantly inhibited the elevation of ST period, significantly reduced myocardial MDA content, significantly increased myocardial SOD activity and significantly depressed the release of CPK and LDH in the rat heart  with isoprenaline�瞚nduced injury.Conclusion   Shenfu injection exerted protective effects on ischemic myocardium injury,which might be related to the inhibition of lipidperoxidation, the enhancement of SOD activity and decrease of myocardial enzyme.

　　Key words： shenfu injection； myocardial ischemial injury；rats

　　近來研究發現，參附注射液在心血管系統疾病方面有廣泛的臨床應用價值，具有保護心肌和防止心肌細胞破壞、治療心律失常等作用［1-3］。本研究以異丙腎上腺素誘導大鼠心肌缺血損傷為模型，觀察參附注射液對心肌缺血損傷的影響，為其臨床用藥提供實驗依據。

　　1  材料和方法

　　1.1  儀器與試藥 工程論文發表

　　BL-420生物記錄系統(成都儀器廠生產)；721型分光光度計(上海第三儀器廠生產)；參附注射液(雅安三九藥業有限公司，批號060713)，異丙腎上腺素注射液(上海禾豐制藥有限公司生產，批號：0608043)，丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、考馬斯亮藍、乳酸脫氫酶(LDH)、血清磷酸肌酸激酶(CPK)試劑盒(南京建成生物工程研究所提供)。

　　1.2 方法

　　SD大鼠40只，體重220g左右，由寧夏醫學院實驗動物中心提供，隨機分成4組：即正常對照組、模型組、中劑量藥物組、高劑量藥物組。給藥組兩組大鼠尾靜脈分別注射參附注射液5、10mg/(kg·w)，每日2次，連續5d，模型組注射0.9%的生理鹽水0.045 mg/(kg·w)；從第4日起，模型組和藥物組均腹腔注射異丙腎上腺素 20 mg/kg，每日1次，連續2 d，對照組大鼠給予同體積生理鹽水。于末次注射異丙腎上腺素5min后，腹腔注射烏拉坦5mL/kg麻醉，連接BL-420生物記錄儀記錄各組大鼠心電圖，2h后取血及心臟待測。

　　1.3  檢測指標

　　①心電圖測定：檢測肢體II導聯ECG，測定給予異丙腎上腺素20min后ST段偏移總毫伏數(∑ST)，作為判斷心肌損傷程度和評價藥物療效的指標。②心肌組織MDA及SOD測定：實驗結束即刻取出心臟，用冰凍生理鹽水制成10%心肌勻漿。按MDA、SOD試劑盒測定并計算心肌組織中MDA、SOD含量，用考馬斯亮藍法測定并計算心肌組織蛋白。③血清LDH、CPK測定：實驗完畢，腹主動脈取血，分離血清，測定血清CPK、LDH含量。

　　1.4  統計學方法

　　數據均以(±s)表示，多組樣本間比較用方差分析，P＜0.05為有統計學意義。
　2  結果

　　2.1  ST段偏移的影響

　　與正常對照組比較，模型組ST段偏移明顯升高(P＜0.01)；與模型組比較，高劑量藥物組可明顯降低異丙腎上腺素所致的ST段的異常抬高(P＜0.01)，見表1。表1  參附注射液對大鼠心電圖ST段偏移的影響(略)

　　2.2  對MDA、SOD的影響

　　比正常組比較，模型組心肌MDA明顯增加(P＜0.01)，SOD明顯降低(P＜0.05)；與模型組比較，藥物組MDA明顯降低(P＜0.01)，SOD值明顯升高(P＜0.05或P＜0.01)，見表2。表2  參附注射液對心肌MDA、SOD的影響(略)
　　
　　2.3  對血清CPK、LDH的影響

　　與正常組比較，高劑量藥物組血清LDH、CPK含量高(P＜0.05)，而模型組明顯升高(P＜0.01)；與模型組比較，高劑量藥物組血清LDH、CPK含量顯著降低(P＜0.01)，見表3。表3  參附注射液對血清CPK、LDH的影響(略)

　　3 討論

    心肌缺血損傷主要由冠狀動脈供血不足或心肌耗氧量增加引起，或上述兩種因素共同作用的結果［4］。已有研究證實［5-6］：Iso誘導的心肌損傷與心肌相對缺血損傷、膜通透性改變、氧自由基損傷等有關，而且皮下注射大劑量Iso造成的大鼠心肌梗死樣損害模型，其心電圖、心肌代謝等變化均與人類自然發生的急性心肌梗死非常接近。因此該模型在一定程度上比冠脈結扎模型更具有實際意義。
   
　　心肌損傷時心肌氧自由基大量產生，清除氧自由基的酶SOD活性下降，導致氧自由基在體內堆積，羥自由基生成增加，對心肌細胞膜產生脂質過氧化作用，膜脂質過氧化產物MDA增高，破壞了細胞膜的結構和功能，使膜流動性下降通透性增加，加速了心肌細胞損害程度［7］。參附注射液可明顯升高心肌缺血損傷后SOD的活力并降低MDA含量。從而增強了內源性氧自由基清除系統的功能，保護內源性抗氧化酶活性發揮，提示該藥對心肌缺血損傷的保護與抗氧化作用有關。
   
　　心肌損傷時，心肌中CPK、LDH釋放入血中，導致血清CPK、LDH濃度顯著升高［8］。本實驗結果顯示，高劑量藥物組大鼠血清CPK、LDH含量降低，提示參附注射液可以抑制心肌組織中CPK、LDH釋放。
   
　　高劑量藥物組可使異丙腎上腺素所致ST段異常抬高程度降低，心肌CPK、LDH釋放減少，SOD活性增高、MDA生成減少，提示參附注射液對異丙腎上腺素所致心肌缺血損傷具有保護作用，其機理可能與抑制脂質過氧化反應，增加自由基清除酶SOD活性，降低脂質過氧化物MDA量；降低CPK、LDH，保護心肌細胞膜等有關。

【參考文獻】工程論文發表
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