黎藥-角花胡頹子抗炎鎮痛活性部位實驗研究

【摘要】  　　目的：探討角花胡頹子莖葉水煎液各萃取部位的抗炎鎮痛作用，為進一步尋找活性成分的研究奠定基礎。方法：采用二甲苯引起小鼠耳腫脹和毛細血管通透性的方法觀察角花胡頹子各萃取部位抗炎作用，采用熱板法和醋酸扭體法觀察角花胡頹子鎮痛作用。結果：角花胡頹子乙酸乙酯萃取層、齊墩果酸能明顯的抑制小鼠耳腫脹(P<0.05)；正丁醇萃取層、齊墩果酸能抑制醋酸致小鼠毛細管通透性增加(P<0.05)；角花胡頹子各部位對小鼠痛閾與扭體反應無明顯影響（P>0.05）。結論：角花胡頹子乙酸乙酯層、正丁醇層萃取部位為抗炎有效部位。

【關鍵詞】  角花胡頹子；抗炎；鎮痛

　　［ABSTRACT］ Objective: To explore the anti�瞚nflammatory and analgesia activities of each partitioned fraction of the decoction extract of stems and leaves of Elaeagnus gonyanthes in the pursuit of its active constituents. Methods: The anti�瞚nflammatory effects of each partitioned fraction were studied on ear�瞫welling and capillary permeability models of mice induced by xylene, analgesia effects were tested on pain mice models prepared by hotplate and acetic acid. Results: Both ethyl acetate and oleanolic acid extract of Elaeagnus gonyanthes could significantly inhibit the ear�瞫welling effects (P<0.05), n�瞓utanol extract and oleanolic acid extract could prohibit the increase of capillary permeability in the studied models (P<0.05). No fraction of this plant showed significant influence on the threshold of pain and writhing response in the models (P>0.05). Conclusions: The ethyl acetate and n�瞓utanol extracts of Elaeagnus gonyanthes are effective fractions responsible for its anti�瞚nflammatory and analgesia activities.
   
　　［KEY WORDS］ Elaeagnus gonyanthes; Anti�瞚nflammatory; Anagesia教育學論文發表 
   
　　角花胡頹子［1］（Elaeagnus gonyanthes Benth.）為胡頹子科胡頹子屬植物，別名羊母奶子、吊中子藤，假甜酸，主要分布在廣東，廣西，湖南，云南，海南等地。以根、葉、果入藥，是海南黎族地區常用藥之一，也是著名黎藥荔花鼻竇炎片的主藥。據《海南植物志》中記載，角花胡頹子具有止咳平喘、祛風通絡、行氣止痛、消腫解毒等作用，主要治療支氣管哮喘、慢性支氣管炎、風濕性關節炎、腰腿痛、河豚中毒、跌打腫痛等。
   
　　目前國內外對角花胡頹子的研究甚少, 未見有關角花胡頹子藥理作用的報道。為了促進該植物資源的合理利用與開發, 本研究將角花胡頹子粗粉水煎煮液，利用有機溶劑（氯仿，乙酸乙酯，正丁醇）進行萃取分離，從乙酸乙酯部位獲得大量齊墩果酸，同時對各個萃取部位與分離出來的齊墩果酸進行抗炎鎮痛實驗研究，以期確定角花胡頹子有效部位。本實驗結果將為進一步深入系統的研究和開發角花胡頹子提供實驗依據。

　　1  材料

　　1.1  動物、藥材
   
　　取清潔級昆明種小鼠，18～22g，雌雄各半，動物合格證號：SCR（豫）2009-0019號。角花胡頹子采自海南省萬寧市，經中國醫學科學院藥用植物研究所海南分所鑒定。阿司匹林（昆明云健制藥有限公司，批號：20080884）。

　　1.2  儀器與試劑
   
　　R-205旋轉蒸發儀（上海申勝生物技術公司）；SHZ-D(Ⅲ)型旋轉蒸發儀（鞏義市英山谷予華儀器廠）；電熱恒溫水浴鍋；智能熱板儀器；電子天平；注射器；V650紫外分光光度計（JASCO日本分光公司）。伊文思藍，石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、二甲苯和醋酸均為分析純試劑。

　　2  方法和結果論文代理發表

　　2.1  供試藥液的制備
   
　　取角花胡頹子莖葉粗粉4.5kg，水煎煮3次，第1次煎煮1.5h，第2和第3次均煮1h，過濾，合并提取液，濃縮至4.5L。依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取濃縮，得氯仿萃取層24.0g，乙酸乙酯萃取層15.0g，正丁醇萃取層13.5g。并對乙酸乙酯萃取層進行化學成分研究，其中分離得到齊墩果酸8.52g。

　　2.2  對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響［2］
   
　　取實驗動物60只，每組10只，隨機分為6組，給藥組分別灌胃給予角花胡頹子氯仿層提取物、乙酸乙酯層提取物、正丁醇層提取物、齊墩果酸。陽性對照組灌胃給予阿司匹林0.2g·kg-1；對照組灌胃給予等容積自來水，連續給藥7d。末次給藥1h后，以20μL二甲苯涂于小鼠右耳廓兩面致炎，左耳廓作為對照，20min后脫頸椎處死小鼠，剪下兩耳，重疊在一起，用直徑4mm打孔器取耳片，稱重，以兩耳重量差表示炎癥反應的強度，實驗結果用F檢驗去掉離群值，t檢驗比較各組差異。按下式計算抑制率，腫脹抑制率（%）=（給藥組兩耳片重量差 ÷ 空白組兩耳片重量差）×100%結果見表1。表1  各萃取部位對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響（略）

　　由表1可以看出：阿司匹林、齊墩果酸、角花胡頹子乙酸乙酯萃取部位能明顯抑制二甲苯所致小鼠耳腫脹(P<0.05)。2.3  對醋酸所致小鼠腹腔毛細管通透性亢進的影響［2］
   
　　取實驗動物60只，隨機分為6組，每組10只，給藥組分別灌胃給予角花胡頹子氯仿層提取物、乙酸乙酯層提取物、正丁醇層提取物、齊墩果酸。陽性對照組灌胃給予阿司匹林0.2g·kg-1；對照組灌胃給予等容積自來水，連續給藥7d，末次給藥1h后各鼠均靜脈注射0.5%伊文思藍生理鹽水溶液10mL·kg-1，隨后腹腔注射0.6%醋酸0.2mL/只，20min后脫頸椎處死，剪開腹部皮膚肌肉，用5mL生理鹽水分次洗滌腹腔，吸管吸出洗滌液，3000 r·min-1離心10min，取上清液與590nm比色測定吸光度值。結果見表2。表2  各