腫瘤標(biāo)志物診斷早期原發(fā)性肝癌的研究與應(yīng)用進(jìn)展

【關(guān)鍵詞】  腫瘤標(biāo)志物;原發(fā)性肝癌;甲胎蛋白;綜述文獻(xiàn)

　　原發(fā)性肝癌(primary hepatic cancer， PHC)是一種惡性程度較高、進(jìn)展較快、預(yù)后較差的惡性腫瘤，肝細(xì)胞癌(hepato�瞔ellular carcinoma，HCC)占其絕大部分，其死亡率僅次于胃癌、食道癌，居第3位。我國(guó)每年死于肝癌約11萬(wàn)人，其中男性8萬(wàn)人，女性3萬(wàn)人，占全世界肝癌死亡人數(shù)的45%[1]。因其初期癥狀并不明顯，發(fā)現(xiàn)時(shí)已多處于晚期，而晚期患者多因癌細(xì)胞擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移導(dǎo)致預(yù)后不良。因此早期診斷和手術(shù)治療是提高肝癌患者5年生存率的關(guān)鍵。目前早期診斷主要是通過檢測(cè)血清肝癌標(biāo)志物，及時(shí)發(fā)現(xiàn)亞臨床期的肝癌，然后進(jìn)行早期切除加以積極綜合治療，所達(dá)到的遠(yuǎn)期效果及五年生存率才能有顯著提高。

　　腫瘤標(biāo)志物(tumor markers, TM)是指存在于腫瘤細(xì)胞內(nèi)或腫瘤細(xì)胞表達(dá)及脫落的物質(zhì)，或是宿主對(duì)于體內(nèi)腫瘤反應(yīng)而產(chǎn)生的物質(zhì)[2，3]。其存在于細(xì)胞胞質(zhì)、胞核中或細(xì)胞膜表面，也可見于循環(huán)血液、其他體液或組織中。這些物質(zhì)，有的只在腫瘤患者體內(nèi)出現(xiàn)，有的在腫瘤患者體內(nèi)含量超過正常人體內(nèi)含量。通過化學(xué)、免疫學(xué)及基因組學(xué)等方法測(cè)定其存在及含量，可間接反映腫瘤的存在并為分析病程、監(jiān)測(cè)療效和復(fù)發(fā)、判斷預(yù)后提供依據(jù)。 在原發(fā)性肝癌(以下簡(jiǎn)稱肝癌)早期診斷發(fā)展史中，甲胎蛋白(AFP)開創(chuàng)了肝癌免疫診斷的先河，使亞臨床肝癌診斷成為可能，并掀起了腫瘤標(biāo)志物研究的熱潮。然而根據(jù)近年來(lái)統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)，肝癌的早期診斷僅靠這一指標(biāo)有一定局限性，其陽(yáng)性率為70%～90%，還有10%～30%的肝癌病例不能早期檢出[4]。因此，聯(lián)合AFP等多種腫瘤標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)早期肝癌已經(jīng)成為當(dāng)前最簡(jiǎn)單有效的方法。本文就幾種主要TM在肝癌早期診斷中的研究與應(yīng)用進(jìn)展做一綜述。

　　1 甲胎蛋白

　　甲胎蛋白(alpha�瞗etal protein， AFP)是最早發(fā)現(xiàn)診斷PHC并具器官特異性的腫瘤標(biāo)志物, 可在出現(xiàn)臨床癥狀8～11個(gè)月前呈陽(yáng)性, 但在PHC 患者中呈陰性或低濃度陽(yáng)性占30%～ 40%[4]。其原因可能與一些肝組織為不分泌AFP 的細(xì)胞株、纖維板層狀肝癌以及肝癌早期AFP 分泌少, 還與腫瘤體積大小、 分化程度、生長(zhǎng)情況、變性壞死及其生物學(xué)特性等有關(guān)。PHC患者AFP呈陰性或低濃度陽(yáng)性的原因尚無(wú)定論[5，6]。部分良性肝病患者AFP 呈低濃度陽(yáng)性, 少數(shù)A FP>400μg/L。其原因可能為肝細(xì)胞炎性壞死，受損的肝細(xì)胞再生幼稚化，重新具有產(chǎn)生AFP 的能力。這說(shuō)明A FP 對(duì)PHC 診斷有局限性, 故探討腫瘤標(biāo)志物聯(lián)檢對(duì)AFP< 400μg/L的PHC診斷有較大臨床價(jià)值[7]。

　　2 肝癌特異性γ�补劝滨＾D(zhuǎn)移酶(HS�睪GT)、GGTmRNA�睭亞型

　　肝癌患者血清γ�补劝滨＾D(zhuǎn)移酶(GGT)活性顯著升高，但特異性較差，大多數(shù)良性肝、膽、胰疾病患者GGT活性也可增高。應(yīng)用聚丙烯酰胺梯度凝膠電泳可將GGT分成1～12條區(qū)帶,其中Ⅱ、Ⅰ′ 、Ⅱ′被稱為肝癌特異性GGT(HS�睪GT)。對(duì)AFP假陰性肝癌(<50μg/L)和小肝癌的診斷率分別為84.0%，78.6%(AFP僅為50%)。與AFP濃度或腫瘤大小無(wú)明顯相關(guān)[8]。Morsi等[9]通過篩選認(rèn)為HS�睪GT等可作為 AFP以外的最佳肝癌標(biāo)志物。隨著對(duì) GGT基因的深入研究，GGTmRNA可望成為檢測(cè)肝細(xì)胞早期癌變的靈敏方法。肝GGT基因可分為3 種亞型：即胎肝(F)、胎盤(P)和肝癌細(xì)胞(H)亞型,其中H亞型陽(yáng)性可能為肝細(xì)胞的癌前期病變，有必要監(jiān)測(cè)觀察[10]。秦成坤等[11]通過臨床試驗(yàn)亦證實(shí)其有助于肝癌的早期診斷。

　　3 異常凝血酶原

　　異常凝血酶原(abnormal prothrombin, APT)系肝臟合成的凝血酶原前體入血，肝癌組織表面羧化酶基因的表達(dá)可使APT積聚增加，但不能使APT轉(zhuǎn)化為具有凝血活性的凝血酶原。對(duì)APT水平在 30～40mAu/mL患者，若影像學(xué)未見明顯異常，應(yīng)密切動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)APT水平，了解是否有發(fā)展為肝癌的可能[12]。一般認(rèn)為APT為陽(yáng)性率高、特異性強(qiáng)的肝細(xì)胞癌標(biāo)志，可作為早期肝細(xì)胞癌的診斷指標(biāo)[4]。

　　4 α�睱�矌r藻糖苷酶

　　α�睱�矌r藻糖苷酶(α�睱�瞗ucosidase, AFU)是存在于多種組織中的一種溶酶體酸性水解酶，其對(duì)早期肝癌診斷的特異性達(dá)82.6%(AFP 68.6%)[13]，國(guó)內(nèi)外均有學(xué)者報(bào)道AFU水平的檢測(cè)對(duì)肝癌尤其是AFP陰性或低水平的肝癌具有較高診斷價(jià)值，它已被作為一種新型的腫瘤標(biāo)志物加以應(yīng)用[14]。

　　5 血清鐵蛋白

　　血清鐵蛋白(serum ferritin, SF)主要由肝細(xì)胞合成，當(dāng)肝癌擠壓肝細(xì)胞使之壞死或肝癌伴有肝硬變時(shí)，肝臟處理循環(huán)血中 SF能力下降，引起血清SF升高[15]。近來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，作為肝癌診斷標(biāo)志，血清鐵蛋白的敏感性和特異性都優(yōu)于AFP[4,16]。

　　6 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子

　　轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(transfer growth factor�拨�1，TGF�拨�1)、TGF�拨�1mRNA是一種多功能的細(xì)胞因子，與細(xì)胞的生長(zhǎng)分化相關(guān)，其表達(dá)增加與肝癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[17]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明[18]，大鼠肝癌發(fā)生發(fā)展過程中TGF�拨�1和TGF�拨�2表達(dá)逐漸升高，肝癌發(fā)生前肝臟損傷和肝硬化階段TGF�拨�1相對(duì)正常組織明顯升高，出現(xiàn)肝癌之后的大鼠肝臟的TGF�拨�1表達(dá)則相對(duì)于正常肝臟和肝癌前期的肝臟損傷和肝硬化階段都有非常明顯的表達(dá)升高。TGF�拨�1的上述變化可以作為觀察指標(biāo)，通過檢測(cè)TGF�拨�1及其受體的含量診斷和監(jiān)測(cè)肝硬化和肝癌的不同階段。亦有研究表明[19-21]，從人肝癌癌灶、癌周組織和外周血單核細(xì)胞中以巢式聚合酶鏈反應(yīng)擴(kuò)增和 DNA測(cè)序證實(shí)其擴(kuò)增片段為TGF�拨�1mRNA。所擴(kuò)增基因片段檢出率，癌灶和癌周組織中分別為100%，46.2%;肝癌組外周血中為53.3%，明顯高于肝硬化組 20.0%和慢性肝炎組5.0%，其他組未見擴(kuò)增片段檢出;3期肝癌組為83.3%，高于1期和2期，TGF�拨�1mRNA過度表達(dá)與肝癌形成有關(guān)，它的分析有助于肝癌診斷和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的監(jiān)測(cè)，且與AFP濃度及腫瘤大小間無(wú)明顯相關(guān)性，可提高AFP陰性肝癌早期診斷陽(yáng)性率[22]。

　　7 磷脂酰基醇蛋白聚糖��3、GPC��3mRNA

　　磷脂�；�醇蛋白聚糖��3(glypican��3，GPC��3)、GPC��3mRNA 是一種硫酸類肝素蛋白多糖，它在絕大多數(shù)肝癌患者中表達(dá)，而在正常肝組織及良性肝臟病變中不表達(dá)[23]。Capurro等[24]測(cè)得53%肝癌患者血清中存在GPC��3的C端片段，而在健康對(duì)照組中無(wú)一陽(yáng)性。另外Nakatsura、Hippo等[25-29]證明，GPC��3的表達(dá)與腫瘤組織的分級(jí)及大小無(wú)關(guān)，與AFP無(wú)關(guān)聯(lián)性。因此，在臨床上檢測(cè)GPC��3可以對(duì)肝癌患者進(jìn)行早期診斷，對(duì)AFP陰性肝癌患者有較高的敏感性。

　　8 高爾基體蛋白73、GP73異質(zhì)體

　　高爾基體蛋白(Golgi protein73，GP73)是存在于高爾基體的一種跨膜蛋白，Kladney 等[30]于2000年首次描述了在正常的人體肝組織中，GP73主要由膽管上皮細(xì)胞表達(dá)，而肝細(xì)胞表達(dá)很少甚至不表達(dá)。但肝細(xì)胞受到病毒感染則可引起GP73的高表達(dá)，Block等[31,32]于